FluorCam zárt GFP/Chl. fluorescens képalkotó rendszer

FluorCamA zárt GFP/Chl. fluorescens képalkotási rendszer számos molekuláris és sejtbiológiai kutatást szolgál a zöld fluorescens fehérjékre. Teljes mértékben szoftverevezérlő és elektromos hajtású szűrőkerekek vannak telepítve a zárt fluorescens képalkotási rendszerekre, valamint számos szűrőcsoport, amely GFP, EGFP, wtGFP, YFP, BFP vagy más sávú fluorescens fehérjék és fluorescensok észlelésére és képalkotására alkalmas.

A FluorCam zárt GFP/Chl. fluorescencia képalkotási rendszer a növények által kibocsátott klorofil fluorescencia dinamikai változásainak és térbeli eloszlásának észlelésére is használható, a Kautsky-hatás folyamatának, a fluorescencia leállításának és egyéb átmeneti fluorescencia folyamatoknak (átmenetek) mérésére, valamint 2D fluorescencia képek készítésére. A kifejezetten tervezett hardveres konfiguráció lehetővé teszi a rendszer automatikus átalakítását fluorescens fehérjék, fluorescens képalkotás vagy klorofil fluorescens érzékelési képalkotásra. A rendszer rendkívül integrált, és a minták sötét alkalmazkodását lehetővé teszi.

Alkalmazási területek:

• Fluorescent fehérjék és fluorescenc vizsgálata

· géntranszfer és bioszenzor technológia

· Gén módosított növénykutatás

· Különböző genotípusok ellenállásának szűrése

• Növény-mikrobiológiai interakciók tanulmányozása

• Növény-állat interakciók kutatása

· Növény fotoszintézis tulajdonságok és metabolikus zavarok szűrése

• Biológiai és nem biológiai kényszerzés kimutatása

A növények erőszakellenállási képessége vagy érzékenységének tanulmányozása

• A légporációk egyenlőtlenségének tanulmányozása

Metabolikus káosz kutatása

• Erősség és termelés értékelése

Funkció jellemzői:

· Egyszerű kezelés, mérési minta magassága állítható, integrált speciális sötét adaptációs doboz, könnyű sötét adaptációs kezelés, üzemeltetés stb.

· Nagy felbontású CCD, akár 1392 x 1040 pixel felbontású, gyors és pontos felvétel klorofil fluorescencia és GFP

· Automatikus ismétlődő képalkotási mérések, egy kísérleti program (protokollok) automatikus ciklus képalkotási mérések beállítása, a képalkotási mérési adatok automatikusan tárolhatók a számítógépen időpont szerint (időbélyegzővel)

A Kautsky-indukciós hatás és a fluorescencia-leállítási elemzés különböző általános kísérleti eljárásaival (protokollokkal) több mint 50 elemzési paraméter mérése

Opcionális TetraCam színes képalkotási modul, maximális képalkotási terület 20 x 25 cm lapok vagy növényi morfológia elemzéséhez

Tipikus minták:

• Levek, szárok, magok, gyökerek, egész növények

• Gyógyuló szövetek, kis ültetékek a petri edényekben

• Gyümölcsök és virágok

• Kék baktériumok, zöld algák, baktériumok

• Gén módosított állatok

Műszaki paraméterek:

• Mérési paraméterek: Fo, Fo’, Fs, Fm, Fm’, Fp, FtDn, FtLn, Fv, Fv'/ Fm'，Fv/ Fm ,Fv',Ft,ΦPSII,NPQ_Dn, NPQ_Ln, Qp_Dn, Qp_Ln, qN, qP，QY, QY_Ln,Rfd, ETR Több mint 50 klorofil fluorescáns paraméter, minden paraméter megjelenítheti a 2D fluorescáns színes képet

Teljes körű automatikus mérési protokoll, amely szabadon szerkesztheti az automatikus mérési programokat

a) Fv/Fm: a mérési paraméterek közé tartozik a Fo, Fm, Fv, QY stb.

b) Kautsky-inducált hatás: Fo, Fp, Fv, Ft_Lss, QY, Rfd és más fluorescenciaparaméterek

c) Fluorescent leállítási elemzés: Fo, Fm, Fp, Fs, Fv, QY, ΦII, NPQ, Qp, Rfd, qL stb. több mint 50 paraméter

d) Fényválasz görbe LC: Fo, Fm, QY, QY_Ln, ETR és egyéb fluorescenciaparaméterek

e) PAR felszívódás és NDVI (opcionális)

f) A reoxidációs dinamika (opcionális)

g) Statikus fluorescens képalkotási mérések, például GFP

h) OJIP gyors fluorescencia dinamikai elemzés (opcionális): Mo (OJIP görbe kezdeti lejtője), OJIP rögzített terület, Sm (az összes fényreakciós központ bezárásához szükséges energia mérése), QY, PI stb. 26 paraméter

Magas felbontású TOMI-2 CCD érzékelő

a) CCD soros szkennelés

b) Maximális képfelbontás: 1360 x 1024 pixel

c) Időfelbontás: Maximális képfelbontás esetén akár 20 képkocka másodpercenként

A/D átalakítási felbontás: 16 bit (65 536 szürkeskála)

e) A kép mérete: 6,45 µm x 6,45 µm

f) működési mód: 1) dinamikus videó mód a klorofil fluorescencia paraméterek méréséhez; 2) pillanatkép mód fluorescens fehérjék és fluorescens festékek, mint például a GFP méréséhez

g) Kommunikációs mód: Gigabit Ethernet

• Fényforrás panel: 4 nagy, nagy intenzitású csomagolású LED fényforrás panel, minden fényforrás panel 8 × 9 LED-ek, a fényforrás panel hatékony területe ugyanaz, mint a képalkotási terület 13 × 13cm

• Fény mérése: szabványos 617 nm vörös fény, egyéb sávak opcionálisak, időtartam 10 µs-100 µs állítható

• Kétszínű fény: 2 piros fény (617nm) + 2 kék fény (470nm), Actinic1 maximális fényerő 300 µmol (fotonok) / m².s, Actinic2 maximális fényerő 2000 µmol (fotonok) / m².s; Maximális fotokémiai fény 3000 µmol (fotonok) / m².s

• Telített fényvillanás: Maximális fényerősség 4000 µmol (fotonok) / m².s, frissíthető 6000 µmol (fotonok) / m².s

• Képző terület: 13 x 13 cm, képelemzés növényi levelek, növényi szövetek, algák, moha, földborítás, egész növények vagy több növény, 96 lyukú lemezek, 384 lyukú lemezek stb.

• GFP mérési modul: 7 bites szűrőkerék és speciális szűrők a GFP (zöld fluorescens fehérje) méréséhez

• PAR felszívódási mérési modul (opcionális): 740 nm-es távolvörös fény (FAR), 660 nm kétszínű LED fényforrás és speciális szűrők a PAR felszívódáshoz és az NDVI méréséhez

• QA az oxidációs dinamikai képalkotási elemzésben (opcionális): STF fluorescencia-dinamikai elemzési mérések végrehajthatók 120 000 µmol (fotonok)/m².s-ig 100 µs-ben

• OJIP gyors fluorescencia dinamikai modul (opcionális): 1 µs-es időfelbontás, az OJIP görbék meghatározása és elemzése több mint húsz kapcsolódó paraméterrel: Fo, Fj, Fi, P vagy Fm, Vj, Vi, Mo, Area, Fix Area, Sm, Ss, N Phi-Po, Psi_o, Phi_Eo, Phi_Do, Phi_pav, ABS/RC (egységi reakciós központ felszívó fény kvantum áramlása), TRo/RC (egységi reakciós központ elszívó fény kvantum áramlása), ETo/RC (egységi reakciós központ elszívó elektron átviteli fény kvantum áramlása), DIo/RC (egységi reakciós központ energiaeltávolítása), ABS/CS (egységi minta-rész felszívó fény kvantum áramlása), TRo/CSo, RC/CSx (reakciós központ sűrűsége), PIABS (egységi reakciós központ elszívó fény kvantum áramlása alapján „teljesítmény” index vagy túlélési index), PIcs (rész alapján „teljesítmény” index vagy túlélési index)

• UV LED fényforrás (opcionális): 365nm vagy 385nm, 1) Multiszínes fluorescencia mérése (részletesen lásd a FluorCam multispektrális fluorescencia képalkotási rendszert); 2) a wtGFP (wild type green fluorescent protein) és a DAPI (4',6-dioxid-2-fenilpirin, egy fluorescens festék) mérése

• Kék LED fényforrás (opcionális): 470 nm, 1) EGFP (erősített zöld fluorescens fehérje) mérése; 2) A légporációs funkció kutatásához

• Zöld LED fényforrás (opcionális): 530 nm, mérés YFP (sárga fluorescens fehérje)

* A wtGFP, DAPI, EGFP, YFP és más fluorescens fehérjék vagy fluorescens festékek méréséhez megfelelő szűrő is szükséges

• FluorCam fluorescens képelemző szoftver funkciói: Live, Protocols, Pre-processing, Result stb.

• Ügyfél testreszabott kísérleti protokollok: beállítható az idő (például a fény mérési időtartama, a fény fotokémiai időtartama, a mérési idő stb.), a fény intenzitása (például a különböző fényminőségű fény intenzitása, a telített fényvillanás intenzitása, a fény mérési modulációja stb.), a felhasználó szabadon hozhat létre új kísérleti programokat a Protocol menüben található varázsló sablonokkal

• Automatikus mérési elemzési funkció: egy kísérleti eljárás (protokoll) beállítása az automatikus, felügyelet nélküli ciklus képalkotási mérésre, az ismétlések száma és az időközönség ügyfél testreszabása, a képalkotási mérési adatok automatikusan tárolódnak a számítógépre időbeli dátumokkal (időbélyegzővel)

  Snapshot mód: a fényerősség, a zár ideje és az érzékenység szabad beállítása a pillanatképzési mód segítségével egyértelmű, stabil fluorescens és azonnali fluorescens képeket készít a növénymintákból

• 

• Képek előfeldolgozása: A programszoftver automatikusan azonosítja több növénymintát vagy területet, vagy manuálisan kiválasztja az érdeklődő régiót (ROI). A kézi kiválasztás alakja négyzet, kör, bármilyen többszög vagy szektor lehet. A szoftver automatikusan méri és elemzi az egyes minták és a kiválasztott területek fluorescenciadinamikai görbéit és a megfelelő paramétereket, minták vagy területek korlátlan számával (> 1000)

• Adat elemzési mód: a "jel átlagos átlagos" mód (aritmétikai átlag) és a "jel átlagos átlagos átlagos" mód, a "jel átlagos átlagos átlagos" mód kiválasztása magas jel-zaj arány esetén, a "jel átlagos átlagos átlagos" mód kiválasztása alacsony jel-zaj arány esetén a zaj által okozott hibák szűréséhez

• A kimeneti eredmények: magas felbontású fluorescenciadinamikai diagramok, fluorescenciadinamikai változás videók, fluorescenciaparaméterek Excel fájljai, histográmok, különböző paraméteres képalkotási diagramok, különböző ROI fluorescenciaparaméterek listája stb.

• CCD érzékelő sávszélesség: 400-1000 nm

· Fényátviteli rendszer: statikus vagy dinamikus (szinusz)

Spektrális válasz: a legnagyobb kvantum hatékonyság (70%) 540 nm-nél, 50%-os átalakítás 400 nm és 650 nm-nél

Olvasási zaj: alacsonyabb, mint 12eRMS, tipikus 10e

Teljes csapda kapacitás: több mint 70 000 e (unbinned)

Bios: Firmware frissíthető

Kommunikációs mód: Gigabit Ethernet

· Méretek: 471 mm (W) × 473 mm (D) × 512 mm (H)

Súly: kb. 40 kg

Bemeneti teljesítmény: körülbelül 1100 W

Táplálkozási feszültség: 90-240 V

Tipikus alkalmazások:

A Sanghaji Élettudományi Intézet a FluorCam segítségével mérte a GFP képezését. A fényes színű növények a GFP kifejezését mutatják. Minél vörös színük, annál több GFP-t mutatnak.

A gomb korall összehúzódása - tágulás különböző időszakokban (T1 = 0, T2 = 30, T3 = 60) NDVI és GFP képalkotási elemzés (Miguel, 2014)

Származási hely: Európa